RT-PCR試劑盒在冬天時的保存方法介紹
點(diǎn)擊次數(shù)：797 更新時間：2020-12-09
37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度，也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應(yīng)動力學(xué)研究時，實(shí)驗(yàn)表明，兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1～2小時，產(chǎn)物的生成可達(dá)。為加速反應(yīng)，可提高反應(yīng)的溫度，有些試驗(yàn)在43℃進(jìn)行，但不宜采用更高的溫度。
但因所需時間太長，在
RT-PCR試劑盒中一般不予采用。保溫的方式除有的儀器附有特制的電熱塊外，一般均采用水浴，可將RT-PCR試劑盒板置于水浴箱中，RT-PCR板底應(yīng)貼著水面，使溫度迅速平衡。為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔，此時可讓反應(yīng)板漂浮在水面上。若用保溫箱，RT-PCR試劑盒應(yīng)放在濕盒內(nèi)，濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等，在盒底墊濕的紗布，將RT-PCR板放在濕紗布上。濕盒應(yīng)先放在保溫箱中預(yù)溫至規(guī)定的溫度，特別是在氣溫較低的時候更應(yīng)如此。無論是水浴還是濕盒溫育，反應(yīng)板均不宜疊放，以保證各板的溫度都能迅速平衡。
保存RT-PCR試劑盒我們要隨著季節(jié)的變化而作出改變，不然的話會影響質(zhì)量。下面給大家講述一下該產(chǎn)品在冬天該怎么保存。
一、要留心避免呈現(xiàn)嚴(yán)峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán)，其有相似過氧化物的活性，因此，在以HRP為符號酶的測定中，如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高，則其就很簡單在溫育進(jìn)程中吸附于固相，然后與后邊參與的HRP底物反應(yīng)顯色。
二、樣本的搜集及血清別離中要留心盡量避免細(xì)菌污染，一則細(xì)菌的成長，其所分泌的一些酶或許會對抗原抗體等蛋白發(fā)作分化作用；二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶自身會對用相應(yīng)酶作符號的測定辦法發(fā)作非特異性攪擾。
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